石河子大学动物科学与技术学院，在2021年发表文章到Frontiers in Immunology的学术期刊中科研者使用美国zeta life转染试剂，高效率转染质粒DNA和siRNA到RAW264.7细胞，具体转染RAW264.7细胞方法经验如下：（注意：本文转染实验中使用的细胞数量、试剂用量和操作方法不适用于传统lipo3000转染试剂或类似产品）All plasmids and siRNAs (20 uM/uL) were transfected using the Advanced DNA  RNA Transfection Reagent™ (ZETA LIFE，USA) according to the manufacturer’s  protocol. Briefly,RAW264.7 cells were planted on the cell culture plate one day in advance, the  cell confluence degree was up to 60 – 80 % at the time of transfection, plasmid or siRNA was directly mixed with transfection reagent according to 1:1 relationship,  then mixed by blowing into a pipette for 10 – 15 times. Following incubation at room  temperature for 10-15 minutes, the complex was added to the cell culture plates, mix 148 gently, and incubated in the CO2 incubator for 24h. All the siRNAs were designed by  Gene Pharma  transfection efficiency was measured using 150 qRT-PCR. Zeta Life介绍：美国 Zeta Life 公司成立于 1989 年，是国际无血清细胞培养基 DMEM/F12 主要完成人，有三十多年的胎牛血清、无血清细胞培养基、以及干细胞、免疫细胞及肿瘤细胞等多种不同类型哺乳动物细胞的无血清培养液生产经验；也是目前世界胎牛血清、无血清培养基＊大的 OEM 供应商之一；每批血清均有完整的血源证明文件、兽医师检验证明及品质测试报告；ZETA LIFE 血清在 100 级的无菌间采用全自动方式制造生产，具有良好的可再现性及可追溯性。  2018 年 Zeta Life 公司与美国加利福尼亚大学旧金山校区联合开发用于哺乳动物细胞、活体动物转染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子转染试剂，此技术成为新的全球蛋白功能、免疫细胞及干细胞治疗、研发及生产的主要关键技术之一。

目的建立一种基于三质粒的慢病毒包装细胞体系并对其感染效率进行检测.方法利用双酶切方法构建一个pLVTHM重组慢病毒表达载体,然后与pSPAX2,pMD2.G共转染HEK293T获取慢病毒原液,利用高速离心的方法对其进行浓缩纯化.设定不同感染复数(1,5,10,15,20),将上述制备的慢病毒制品感染HEK293T和HepG2肝癌细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达水平以确认制备的病毒是否成功,其感染效率如何.结果利用一段非沉默性基因片段,构建了一个pLVTHM重组慢病毒表达载体,将其与两个包装质粒共转染HEK293T细胞后,荧光显微镜下可见发出明亮绿色荧光,证明上述载体成功转染到包装细胞中.于转染后42h和66h分别收集细胞培养上清,获得含有慢病毒的原液,对病毒进行浓缩后获得浓度为1×108 TU/ml的病毒浓缩液.利用浓缩的病毒感染HEK293T和HepG2细胞,随着感染时间及感染复数值的增加,细胞内绿色荧光表达明显增强,感染后24h 时HEK293T细胞内即可见明亮绿色荧光,其感染效率约为60%;在较难进行基因转染的HepG2细胞中,感染后24h后约40%的细胞可见明亮绿色荧光.结论成功建立了三质粒慢病毒包装细胞体系,该体系可成功表达含有目的基因的慢病毒,为后续系列研究提供了重要的工作平台.

 人类疾病,尤其是一些重大常见疾病,如心脑血管疾病、精神系统疾病、内分泌系统疾病、肿瘤等的诊断、治疗结果和预后,在临床上存在着巨大的人群和个体间差异。个体化诊疗将成为疾病临床诊断和治疗中的新方向和必然趋势,是21世纪生物医学的重点方向之一。药物基因组学是研究和实现个体化诊疗的重要基础,目前用于基因检测的方法有很多种,每种方法都有自己的特点与优势,在应用时也存在着不同程度的局限性。本课题针对抗癌药物的几个相关基因选出三种不同的检测方法进行应用研究。 首先应用本实验室已建立的缺口-连接酶链反应法(Gap-LCR法)检测了10例样本的CYP2D6基因的七个位点的多态性,检测结果显示该方法应用良好；同时采用其他方法对结果进行验证,进一步的验证了该方法的可操作性和可靠性。Gap-LCR法检测基因突变位点的成本较低且重复性好,对仪器要求比较简单,能在有限的实验室条件下开展SNP的检测,非常适合于临床推广使用。 Sanger测序法能直观地读出序列,是确定突变的金标准。我们应用Sanger测序法对肿瘤靶向治疗药物相关基因的突变位点进行检测,包括K.ras、EGFR、C-kit、PDGFRA等基因等突变频率较高的位点；基因的检测结果可以预测相应药物的疗效。Sanger测序法检测肿瘤靶向治疗相关基因的突变,结果直观、可靠,但是由于癌瘤组织的不均一性和样本来源的局限以及该技术自身的局限,一些突变程度较低的基因(20%)则无法检测出来。我们还在检测普通序列方法的基础上优化了一个高GC含量序列的测序方法。 本实验还应用高分辨率溶解曲线技术(HRM)检测了氟尿嘧啶类药物相关的药物疗效及毒性预测基因——DPYD和TYMS这两个基因的相关位点的基因多态性。本方法的成功建立为氟尿嘧啶类药物相关的药物疗效及毒性预测基因的检测又提供了一个新的选择。该基因分型方法因成本低廉、快速方便、灵敏度高等,与以往的检测方法相比更有优势。我们还建立了DPYD基因的两个多态性位点的阳性质控体系,为未知样本的检测结果的分析提供了依据。

“我们将面向大众推出早期肿瘤风险筛查项目，一次性可检测多达42种高发性肿瘤，共涉及110个肿瘤相关基因„„”在去年的全国健康管理（体检）机构建设与发展大会上，开发区企业安诺优达的**项目一经发布，就吸引了全国的关注，这是目前国内＊全面的肿瘤基因检测。    它的检验结论真的物有所值吗？到底谁需要做这样的检测，要怎么测？价格是否会令人望而生却？安诺优达**执行官梁峻彬博士对此做了一一解读。 怎么测？ 抽5毫升血可预知患癌风险    一次性检测那么多种肿瘤基因，要怎么测，是否需要承受巨大的痛苦？这是很多人的疑问      对此，梁峻彬表示，测序是基因检测的“金标准”。我们的肿瘤基因检测就是通过测序技术对医学上与肿瘤相关的基因进行扫描，获得受检者基因序列信息后，再与临床遗传突变数据库进行对比，得到相关序列突变信息和对应的医学意义。此后，再结合受检者健康调查信息等给出进一步的风险评估和生活建议。“而这种检测，只需要抽取5毫升血液即可。”肿瘤发生是基因和环境相互作用的结果。根据大量医学遗传学和基因组学研究结果，一些肿瘤表现出某种程度的遗传倾向性，如乳腺癌、肺癌、结直肠癌、胃癌、鼻咽癌等。目前已经证实了一些基因与特定肿瘤的关系非常明确，可以用于肿瘤早期筛查。    谁要测？    有家族遗传病史＊有必要 “不是所有人都有必要做基因检测。”梁峻彬建议，家族中已有人患某种疾病的高危人群可进行检测。在一个家族中，尤其是直系亲属，如果有两个或以上的肿瘤患者，那么就提示其可能存在遗传倾向，建议其尽早进行基因检测。临床数据显示，从这些人群某些特定的基因上能发现所携带的有害突变，他们日后罹患肿瘤的风险要比无家族史人群显著增加。    “一般来说，越是年轻的时候发现肿瘤，其遗传性的可能性就越大。因此，如果家族中有亲属患有某种癌症，且是青壮年发病，就有必要做相关的基因检测，明确是否携带易感基因或致病基因。从而做到尽早预防和早期干预。当然，这还是要根据每个人的不同情况，以及经济状况来综合考虑。”   另外，人类疾病的发生是基因、环境共同作用的结果，环境因素不可忽略。长期暴露在高污染环境或不良生活的习惯，是导致患病风险增高的又一重要原因。若检测出某种疾病的风险，有必要采取一些合理的干预措施、避免或延缓疾病的发生。

 遗传基因检测通过指导蛋白质的合成来表达自己所携带的遗传信息，从而控制生物个体的性状表现。 一般在家族中有遗传病史的人，都会担心下一代的健康。对于遗传病是否容易遗传到下一代，有一种简单的测定方法，就是查看双方四代以内是否有病历。如果要进行详细的检测，就需要进行遗传基因检测了。 如果你对自己及后代的健康负责，就要尽可能全面地了解家族病史。亲人的某些疾病可能正是基因专家用来分析你患病几率的核心。通过基因序列的检测，结合您的家族病史，会更有把握的预测你患遗传病的几率。 遗传基因检测人员用专用采样棒从被测者的口腔黏膜上刮取脱落细胞，或者是抽取血样，通过先进的仪器设备，科研人员就可以从细胞中得到被测者的DNA样本，对这些样本进行DNA测序和SNP单核苷酸多态性检测，就会清楚的知道被测者的基因排序和其他人有哪些不同，经过与已经发现的诸多种类疾病的基因样本进行比对，就可以找到被测者的DNA中存在哪些疾病的易感基因。 通过遗传基因检测，可向人们提供个性化健康指导服务、个性化用药指导服务和个性化体检指导服务。就可以在疾病发生之前的几年、甚至几十年进行准确的预防，而不是盲目的保健;人们可以通过调整膳食营养、改变生活方式、增加体检频度、接受早期诊治等多种方法，有效地规避疾病发生的环境因素。